Desarrollo y validación de dos inmunoensayos para la detección de Brucella canis en perros

Victor Palacios-Rodríguez, Beatriz Arellano-Reynoso, Alejandro Benítez-Guzmán, Aldo Morales-Aguilar, Francisco Suárez-Güemes

Resumen

La brucelosis canina es causa de falla reproductiva y la detección temprana en los perros infectados sigue siendo un desafío. El objetivo del presente estudio fue probar dos antígenos para ser utilizados en dos diferentes inmunoensayos, para la detección de infección por Brucella canis en perros: uno a partir de antígeno crudo sonicado de Brucella canis RM6/66 (CA-iELISA) y otro utilizando la proteína inmunodominante GroEL (GroEL-iELISA). Se determinó el punto de corte usando sueros de perros infectados; posteriormente, se midió la reproducibilidad y se obtuvo un coeficiente de variación (CV) debajo de 15 % para negativos y positivos con el CA-iELISA, mientras que, para el GroEL-iELISA fueron superiores a 15 %. En la prueba de robustez, hubo diferencias significativas para el GroEL-iELISA, más no para el CA-iELISA. La prueba de selectividad mostró reacción cruzada con Leptospira interrogans en el CA-iELISA, y con L. interrogans y Salmonella spp. en el GroEL-iELISA. A partir de las pruebas de la estabilidad de la muestra se demostró que éstas deben almacenarse a temperatura ambiente no más de 2 horas, a 4 ºC no más de 24 horas y pueden mantenerse a -20 ºC hasta 30 días. Finalmente, se calcularon la sensibilidad y especificidad, resultando 100 % ambas para el CA-iELISA; una sensibilidad de 44 % y especificidad de 67 % para el GroEL-iELISA. En conclusión, el CA-iELSA demostró ser mejor en detectar a Brucella canis que el GroEL-iELISA.

Palabras clave

Brucella canis; Brucelosis canina; GroEL; ELISA

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