av Abanico veterinario Abanico vet 2007-428X 2448-6132 Sergio Martínez González 10.21929/abavet2021.30 00120 Artículo Original Respuesta productiva y balance de nitrógeno en pollos adicionados con sustancias húmicas en el agua de bebida 0000-0002-0905-4959 Gómez-Rosales Sergio 1 * 0000-0001-6399-3589 Angeles María 1 0000-0003-1844-477X Maguey-González Jesús 2 Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Fisiología y Mejoramiento Animal, Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y Pecuarias. Km. 1 Carretera a Colón, Ajuchitlán, Colón, Querétaro, México. CP 76280. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y Pecuarias Querétaro México Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán, Universidad Nacional Autónoma de México. Km. 1 Carretera a Colón, Ajuchitlán, Colón, Querétaro, México. CP 76280. Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán Universidad Nacional Autónoma de México Querétaro Mexico Autor responsable y de correspondencia: Gómez-Rosales Sergio, Av. del Marqués 3100-40. Col. Centro Sur. Querétaro, Querétaro, México. CP 76090. gomez.sergio@inifap.gob.mx angeles.lourdes@inifap.gob.mx magueyjesus@gmail.com 31 10 2021 Jan-Dec 2021 11 e120 04 08 2020 08 07 2021 Este es un artículo publicado en acceso abierto bajo una licencia Creative Commons RESUMEN:

Las sustancias húmicas obtenidas de lombricompostas son una opción para mejorar la productividad y reducir las emisiones de amoniaco en las casetas de pollos de engorda. El objetivo del estudio fue evaluar la adición de lixiviado de lombricomposta crudo (LLC) o pasteurizado (LLP) al 20 % en el agua de bebida sobre las variables productivas y de canal, la composición y ganancia de componentes químicos de pollos y camas y la retención y pérdidas de nitrógeno en pollos de 21 a 45 días de edad. Se ofreció una dieta convencional adicionada con antibióticos promotores del crecimiento durante todo el experimento. Los resultados indican que se mejoró (P<0.05) el rendimiento de la pechuga en pollos adicionados con 20 % de LLP en el agua de bebida comparados con los pollos que bebieron el LLC o solo agua. La adición de 20 % de LLC o LLP no mejoró la retención de nutrientes en los pollos o las camas ni el balance o pérdidas de nitrógeno en pollos de 21 a 45 días de edad. El LLP se puede a adicionar en el agua de bebida de pollos para mejorar el rendimiento de la pechuga.

 Palabras Clave: pollos lixiviado de lombricomposta sustancias húmicas nitrógeno amoniaco INTRODUCCIÓN

Las sustancias húmicas (SH) se han evaluado desde hace algunos años como aditivos promotores del crecimiento y mejoradores de la salud en pollos de engorda y gallinas de postura (Sanmiguel et al., 2014; Arif et al., 2019). Los resultados de investigación en pollos de engorda adicionados con SH indican mejoras en el peso corporal, conversión alimenticia, peso de la canal y morfología de las vellosidades intestinales (Ozturk et al., 2012; Taklimi et al., 2012; Disethle et al., 2017). También se ha observado mayor digestibilidad y retención de energía, nitrógeno y cenizas en pollos suplementados con SH en el agua de bebida (Gomez-Rosales y Angeles, 2015).

Los componentes principales de las SH son los ácidos húmicos (AH), ácidos fúlvicos (HF) y huminas; se originan de la descomposición de la materia orgánica, son muy comunes en la naturaleza y se encuentran presentes de manera natural en el agua de bebida, suelo y lignito. Las SH son moléculas con estructura tridimensional que contienen un núcleo aromático con oxígeno y nitrógeno heterocíclicos; en las cadenas laterales hay grupos funcionales que confieren cualidades coloidales, espectrales, electroquímicas y de intercambio de iones (Lehmann y Kleber, 2015; Piccolo et al., 2019). Las SH se pueden encontrar en concentraciones de entre 8-12% en las compostas y lombricompostas preparadas con diferentes fuentes de materia orgánica y estiércol de animales domésticos (Gómez et al., 2013). Las SH se encuentran también, aunque en cantidades menores, en el líquido (lixiviado) que escurre de las camas de lombricompostas después de irrigarlas.

Dos de los mecanismos de acción propuestos sugieren que las SH actúan: 1) aumentando la permeabilidad de las membranas por su efecto detergente, ya que se comportan como surfactantes naturales y puede adsorberse en diferentes superficies que incluyen membranas biológicas aumentando la absorción de nutrientes (Gad El-Hak et al., 2012; Disetlhe et al., 2017) y 2) como agentes detoxificantes en el intestino debido a su poder reductor en la absorción de nitratos, fluorudos y metales pesados (Taklimi et al., 2012; Orsi, 2014). Las SH pueden inhibir la producción de amoniaco del suelo y rumen, lo que se ha asociado a una mayor eficiencia de síntesis de proteína microbiana (Zhang et al., 2013; Terry et al., 2018). También las SH reducen las emisiones de amoniaco del estiércol de cerdos suplementados con diferentes fuentes de SH por una probable reducción de la actividad ureásica bacteriana (Ji et al., 2006) y la concentración de amoniaco en excretas frescas de pollos suplementados con SH (Maguey-Gonzalez et al., 2018).

Los pollos de engorda son alimentados con dietas altas en proteína, lo que puede ocasionar excesos de amoniaco en el interior del intestino (Qaisrani et al., 2015; Lemme et al., 2019), causando daños en la mucosa como reducción de la altura de las vellosidades y profundidad de las criptas (Feng-Xiang et al., 2012; Zhang et al., 2015). En el interior de las casetas también se presentan mayores emisiones de amoniaco provenientes de las excretas de la cama, debido a la alta excreción de N, provocando reducciones de la ganancia de peso e incremento de la conversión alimenticia (Zhang et al., 2015); además de daños en el flujo de moco, la acción ciliar y las membranas mucosas del tracto respiratorio (Wang et al., 2020; Zhou et al., 2020); reducción de los títulos de anticuerpos específicos y otras funciones inmunes, con incremento en la susceptibilidad a enfermedades e incremento en la mortalidad (Wei et al., 2015; Zhou et al., 2020). En un estudio previo se observó que pollos de engorda suplementados con un lixiviado de lombricomposta (LL) tuvieron mayor retención de N conforme se aumentó la dosis de LL, respecto al grupo control (Gomez-Rosales y Angeles, 2015); también se observó reducciones de hasta 30 % en el contenido de amoniaco en excretas de pollos suplementados con SH extraídas de lombricomposta (Maguey-Gonzalez et al., 2018).

La obtención de lombricompostas a partir de excretas animales representa una opción sustentable para el reciclaje de nutrientes y la mitigación de emisiones de gases de tóxicos como el amoniaco, y además son una fuente renovable de SH que adicionadas en los alimentos de pollos de engorda tienen la capacidad de mejorar el crecimiento, la retención de nitrógeno y reducir las emisiones de amoniaco de las excretas (Maguey- Gonzalez et al., 2018; Domínguez-Negrete et al., 2019). En trabajos previos en pollos suplementados con SH extraídas de lombricomposta los alimentos ofrecidos a los pollos estuvieron desprovistos de antibióticos promotores del crecimiento (Gomez-Rosales y Angeles, 2015; Maguey-Gonzalez et al., 2018; Domínguez-Negrete et al., 2019), pero se desconoce si los efectos positivos de las SH sobre el crecimiento y uso del nitrógeno en pollos suplementados con SH y antibióticos promotores del crecimiento en la misma dieta. Esta información es importante ya que en México la adición de antibióticos promotores del crecimiento en los alimentos es una práctica común. Con los antecedentes anteriores, se diseñó un estudio con el objetivo de evaluar la adición de lixiviado de lombricomposta crudo o pasteurizado sobre las variables productivas y de canal, composición y ganancia de componentes químicos de pollos y camas y la retención y pérdidas de nitrógeno en pollos de 21 a 45 días de edad.

 MATERIAL Y MÉTODOS Ubicación, animales y diseño del experimento

El estudio se llevó a cabo en el Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Fisiología y Mejoramiento Animal del Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP). El protocolo fue revisado y aprobado por el Comité de Ética de Uso de Animales y cumplió con la Norma Oficial Mexicana (NOM-062-ZOO, 1999). Se usaron 421 pollos Ross 308 de 21 a 45 días, alojados en piso (17-18 pollos/jaula), con ocho réplicas por tratamiento y se alimentaron con una dieta formulada con base en maíz y pasta de soya, para cubrir las recomendaciones de nutrientes de la estirpe, ofrecida a libre acceso. Se incluyó bacitracina metileno disalicilato (BMD) al 11 % como antibiótico promotor del crecimiento a dosis de 500 ppm equivalentes a 55 ppm de principio activo; y salinomicina al 12 % a dosis de 500 ppm equivalentes a 60 ppm de principio activo para la prevención de coccidiosis. Los tratamientos fueron los siguientes: 1) los pollos recibieron agua de bebida directamente de una cisterna de almacenamiento conectada a bebederos de campana, 2) se mezcló 80 % de agua de la cisterna con 20 % de LL crudo (LLC) y 3) se mezcló 80 % de agua de la cisterna con 20 % de LL pasteurizado (LLP). El LL se obtuvo de una lombricomposta preparada con estiércol de borrego. En el tratamiento 2, antes de mezclar el LL con el agua de bebida se filtró usando tela de algodón (pañalina). En el tratamiento 3, el LL de filtró y se sometió a calentamiento a 65 oC durante 1 h antes de mezclarlo con el agua. En los tratamientos 2 y 3, la mezcla de agua y LL se puso en garrafas de plástico de 20 L y se conectaron a los bebederos de campana. El contenido de AH, AF y ácidos húmicos totales (AHT) fue de 0.30, 0.33 y 0.66 %, respectivamente.

 Registro de variables productivas

Se registró el peso corporal de los pollos al inicio y final del estudio y se estimó la ganancia diaria de peso (GDP, g/d) por la diferencia entre el peso final (42 d) y el peso inicial, dividido entre el número de días del experimento. También se llevó un control del alimento ofrecido y rechazado para estimar el consumo diario de alimento (CDA, g/d). La conversión alimenticia (CA) se calculó dividiendo el CDA entre la GDP. Se cuantificó el consumo diario de agua (CDAg, ml/d) y se calculó el consumo de agua/consumo de alimento. Se llevó registro diario de la mortalidad. Al final del experimento y después de un ayuno de 12 h se sacrificaron cinco pollos de cada corral y se registró el peso de la canal y la pechuga. El peso de la canal y la pechuga se expresaron en gramos (g) y el rendimiento se calculó en porcentaje (%), dividiendo entre el peso corporal.

 Toma de muestras y análisis de laboratorio

Al inicio del experimento, antes de poner los pollos en los corrales, se limpió el piso, colocando 11 kg de aserrín nuevo y se tomó una muestra; al final se pesó la cama completa y se tomó una muestra de cada corral. Al inicio del experimento se sacrificaron tres grupos de pollos de la misma parvada de los pollos usados en el experimento; al final se sacrificaron tres pollos por corral con un promedio de peso similar al peso promedio por corral. También se tomaron muestras del alimento cada semana.

Las muestras de camas fueron liofilizadas y molidas usando una criba de 2 mm. Los pollos sacrificados fueron desplumados y se registró el peso de las plumas y del cuerpo, analizándolos por separado. El cuerpo completo fue molido en un molino para carne y se tomó una muestra representativa. El cuerpo y las plumas se liofilizaron por separado y se molieron. Las muestras de alimento fueron molidas usando una criba de 2 mm. En las muestras de camas, cuerpo de los pollos, plumas y alimentos se determinó la materia seca (MS), cenizas (C) y nitrógeno (N). Todas las determinaciones de laboratorio se llevaron a cabo siguiendo las recomendaciones del AOAC (2019).

 Cálculos de la composición química de los pollos y camas

Para estimar la MS, C y N total de las camas y de los pollos al inicio y final del experimento en cada corral, se usaron las siguientes fórmulas:

MS, C y N en las camas, kg =% de MS,C y N x peso de las camas;

MS, C y N en los pollos , kg *= (% de MS, C y N de los pollos x peso de los pollos) + (%de MS,C y N de las plumas x peso de la plumas, kg);

* La suma del N del cuerpo y las plumas se hizo en las cantidades equivalentes al peso del cuerpo y las plumas al inicio y al final del experimento.

Consumo total de alimento, kg =CDA x número de pollos por corral x 24 dias

Consumo total de MS, kg =% de MS del alimento x consumo total de alimento;;

Consumo total de N, kg = Consumo total de MS x % de N en el alimento;

 Cálculos de la ganancia de componentes químicos de los pollos y camas

Para calcular la ganancia de componentes químicos en los pollos por corral, se usaron las siguientes fórmulas:

Ganancia de C en los pollos , kg =MS total de los pollos al final- MS total de los pollos al inicio del experimento;

Ganancia de C en los pollos, kg =C total de los pollos al final -C total de los pollos al inicio del experimento;;

Ganancia de N en los pollos, kg = N total de los pollos al final - N de los pollos al inicio del experimento;

Para calcular la ganancia de componentes químicos en las camas por corral se usaron las siguientes fórmulas:

Ganancia de MS en las camas, kg= MS total en la cama al final - MS total en la cama al inicio del experimento;

Ganancia de C en las camas,kg= C total en la cama al final - C total en la cama al inicio del experimento;

Ganancia de N en la camas ,kg,= N total en la cama al final -N total en la cama al inicio del experimento;

 Cálculos de la retención y pérdidas de nitrógeno

Para obtener la retención de N en kg y en porcentaje en los pollos y en las camas por corral, se usaron las siguientes fórmulas:

Retencion de N en pollos,kg = N total en los pollos a los 45 dias - N total en los pollosa los 21 días;

Retención de N en los pollos ,% =

N total en los pollos a los 45 dias-N total en los pollos a los21 díasConsumo Total de NX 100

Retención de N en las camas, kg = N total en las camas a los 45 días - N total en las camas a los 21 días;

Retencion de N en las camas ,%=

N total en los camas a los 45 dias-N total en las camas a los21 díasConsumo Total de NX 100

Retencion de N en pollos y camas, kg = N total en los pollos y camas a los 45 días - N total en los pollos y camas a los 21 días;

Retención de N en los pollos y camas ,%=

N total en los pollos y  camas a los 45 dias-N total en las pollos y  camas a los21 díasConsumo Total de NX 100

La cantidad de N perdido en total, por pollo y por kg de pollo producido se calculó de la siguiente manera:

N perdido en total, kg = Consumo total de N, kg - retención de N en pollos y camas, kg;

N perdido  por pollo producido,gd=(N perdido en total, kgNumero de pollos)÷24 N perdido  por pollo producido,gd=(N perdido en total, kgTotal de kilos producidos)÷24 Análisis estadístico

Los resultados fueron sometidos a análisis de varianza bajo un diseño completamente al azar, usando los procedimientos de los Modelos Lineales Generales del paquete estadístico SAS. Previo a los análisis de varianza, se llevó a cabo la verificación de supuestos. En las variables GDP y CDA se transformaron usando el inverso multiplicativo y todas las variables expresadas en porcentaje se transformaron a arcoseno para cumplir con el supuesto de normalidad. Las diferencias estadísticas entre medias, se analizaron usando la metodología de la mínima diferencia significativa a P < 0.05.

 RESULTADOS Y DISCUSIÓN Variables productivas y de la canal

En la tabla 1 se presentan las variables productivas, peso y rendimiento de la canal y la pechuga. El peso inicial, peso final, consumo de alimento, ganancia de peso, conversión alimenticia, consumo de agua y el consumo de agua/consumo de alimento y mortalidad fueron similares entre los tres tratamientos evaluados. Estos hallazgos no concuerdan con los de un estudio en pollos adicionados con LLC en el agua de bebida (Gomez- Rosales y Angeles, 2015), obteniéndose beneficios en el peso final, ganancia de peso y la conversión alimenticia; pero usando dietas desprovistas de antibiótico promotor del crecimiento y productos anticoccidiales. Uno de los propósitos del presente trabajo fue esclarecer si los efectos benéficos del LLC sobre el crecimiento de los pollos se podrían mantener a pesar de la presencia de BMD y salinomicina; sin embargo, los resultados de productividad muestran que los beneficios del LLC observados previamente usando dietas sin antibióticos se perdieron. La pasteurización del LL se llevó a cabo con la intención de eliminar los microorganismos presentes de manera natural y anulando algún posible efecto promotor del crecimiento que pudiera ejercer la flora benéfica; como se ha sugerido en pruebas de crecimiento de plantas adicionadas con LL, como fuente de SH (Canellas et al., 2015; Olivares et al., 2015). Otra diferencia importante fue que en el trabajo previo se usó un LL proveniente de una lombricomposta, hecha con estiércol de cerdo y borrego que contenía 0.47, 0.14 y 0.61 % de AH, AF y AHT, respectivamente (Gomez-Rosales y Angeles, 2015); y en el presente trabajo se usó un LL obtenido de una lombricomposta, hecha con estiércol de borrego que contenía 0.30, 0.33 y 0.66 % de AH, AF y AHT, respectivamente.

El rendimiento de la pechuga fue mayor (P < 0.05) en los pollos que bebieron el LLP, respecto a los que bebieron solo agua y LLC (tabla 1). El peso y rendimiento de la canal y pechuga fueron similares entre tratamientos. En un estudio previo se obtuvo mayor rendimiento de la canal de pollos adicionados con SH extraídas de lombricomposta (Domínguez-Negrete et al., 2019). También se ha reportado mayor peso y rendimiento de la canal en pollos suplementados con cantidades crecientes de SH en el alimento y en el agua de bebida comparados con el grupo control no adicionado con SH (Ozturk et al., 2010; Ozturk et al., 2012). En un reporte previo se encontró que las SH sometidas a calentamiento por más de 40 min conservan sus propiedades detergentes, pero presentan una menor capacidad de transferencia de electrones de grupos químicos lábiles que se pierden durante el calentamiento (Visser, 1985); probablemente al reducirse las reacciones asociada al intercambio de electrones entre las SH y diferentes aceptores, y destacarse solo el efecto surfactante, aumentando la permeabilidad de las membranas; provocando el mayor rendimiento de pechuga con el LLP, comparado con el LLC.

Variables productivas, peso y rendimiento de la canal y la pechuga
Lixiviado de lombricomposta Error estandar de la media
Agua Crudo Pasteurizado
Peso corporal Día 21, kg 0.66 0.64 0.66 0.011
Día 45, kg 2.23 2.23 2.26 0.031
CDA, g/día 142.48 141.92 142.87 1.922
GDP, g/día 84.48 87.21 88.09 3.482
CDA/GDP 1.69 1.65 1.64 0.056
CDAg, ml/día 310.82 300.44 299.79 8.747
CDAg/CDA 2.19 2.11 2.08 0.065
Mortalidad, % 2.50 3.57 2.86 1.336
Pechuga, g 488.61 488.12 497.49 11.360
Pechuga, % 23.55a 23.43a 24.67b 0.397
Canal, g 1193.31 1204.44 1205.26 23.301
Canal, % 57.58 57.89 59.82 0.751

Variables productivas n= 8. Pechuga y canal n= 40.a-b Diferente letra en la misma fila muestra valores estadísticamente distintos (P < 0.05)

 Composición y ganancia de componentes químicos de los pollos

La composición química de los pollos sacrificados al inicio y final del experimento y la ganancia de componentes químicos se presentan en la tabla 2. La composición química inicial no se analizó estadísticamente porque solo se tomó una muestra representativa de los pollos. No hubo diferencias estadísticas en la composición química o ganancia de componentes químicos de los pollos al final. Los resultados no concuerdan con las mejoras en la eficiencia de uso de proteína y retención de N y C en pollos suplementados con SH (Gomez-Rosales y Angeles, 2015; Disetlhe et al., 2017), a través del método de colecta de excretas.

Composición química de los pollos al inicio y final del experimento y ganancia de componentes químicos
Lixiviado de lombricomposta Error estandar de la media
Agua Crudo Pasteurizado
Composición quimica a los 21 días
Materia seca, % 26.79 26.79 26.79 ND
Cenizas, % 7.78 7.78 7.78 ND
Nitrógeno, % 12.06 12.06 12.06 ND
Composición química a los 45 días
Materia seca, % 33.15 33.72 34.46 0.809
Cenizas, % 8.23 7.77 7.8 0.307
Nitrógeno, % 12.11 11.95 12.13 0.065
Ganancia de componentes químicos por corral a
Materia seca, kg 9.74 9.78 10.55 0.352
Cenizas, kg 2.31 2.09 2.19 0.127
Nitrógeno, kg 1.18 1.16 1.22 0.048

Composición química n= 24. Ganancia de componentes químicos n= 8, ND = no determinado. a No se observaron diferencias estadísticas significativas entre tratamiento (P > 0.5)

Se ha reportado que las SH son capaces de regular la disponibilidad de N para las plantas en el suelo, debido a sus propiedades adsorbentes, uniéndose directamente con el amoniaco o estimulando la actividad de bacterias desintegradoras que facilitan la absorción del N a través de las raíces (Canellas et al., 2015; Olivares et al., 2015). Se esperaba que este mismo efecto se pudiera llevar a cabo en el intestino de los pollos, reduciéndose los niveles de amoniaco liberado en el tracto digestivo, mejorando la salud, producción y retención de nutrientes (Qaisrani et al., 2015; Lemme et al., 2019). Probablemente la presencia de BMD y salinomicina contrarrestó los efectos de las SH observados en trabajos previos.

En la tabla 3 se muestra la composición química de las camas al inicio y final del experimento y la ganancia de los componentes químicos. Los componentes químicos al inicio no se analizaron estadísticamente porque solo se tomó una muestra representativa de las camas. No hubo diferencias estadísticas en la composición química o ganancia de componentes químicos de las camas al final. En estudios previos se ha reportado que las SH pueden inhibir la actividad ureásica presente en bacterias del suelo (Zhang et al., 2013) y las emisiones de amoniaco de excretas de cerdos y pollos suplementados con SH (Ji et al., 2006; Maguey-Gonzalez et al., 2018).

Composición química de las camas al inicio y final del experimento y ganancia de componentes químicos
Lixiviado de lombricomposta
Agua Crudo Pasteurizado Error estándar de la media
Composición química a los 21 días
Materia seca, % 97.66 97.66 97.66 ND
Cenizas, % 4.77 4.77 4.77 ND
Nitrógeno, % 1.53 1.53 1.53 ND
Composición química a los 45 días
Materia seca, % 70.87 71.61 69.29 2.936
Cenizas, % 17.89 18.19 18.15 0.53
Nitrógeno, % 3.6 3.51 3.54 0.074
Ganancia de componentes químicos por corral
Materia seca, % 10.46 9.4 9.6 1.199
Cenizas, % 3.26 3.16 3.17 0.213
Nitrógeno, % 0.61 0.55 0.56 0.054

Composición química y ganancia de componentes químicos n= 8. ND = no determinado. a No se observaron diferencias estadísticas significativas entre tratamiento (P > 0.5)

En el presente estudio se esperaba que las SH se unieran al amoniaco en el interior del intestino y en las camas, reduciendo las pérdidas de N por volatilización, y en consecuencia, mayor retención de N en las camas al final. Probablemente la presencia de los antibióticos contrarrestó los efectos de las SH en las camas.

 Retención y pérdidas de nitrógeno de los pollos y las camas

En la tabla 4 aparecen los resultados de balance y pérdida de nitrógeno durante el experimento. Ninguna de las variables analizadas mostró diferencias entre tratamientos. Estos hallazgos no coinciden con el mayor rendimiento de la pechuga, que pudieran sugerir que hubo mayor eficiencia en el uso del N para la síntesis de proteínas musculares, ni con la mayor retención de N reportada en un trabajo previo en pollos suplementados con LLC (Gomez-Rosales y Angeles, 2015). Los resultados no concuerdan con las mejoras en la eficiencia de uso de proteína y retención de N y C en pollos suplementados con SH (Gomez-Rosales y Angeles, 2015; Disetlhe et al., 2017). La falta de diferencias en el balance de N, coincide con la falta de diferencias en la productividad de los pollos. La eficiencia de retención de N en los pollos, las camas y los pollos + camas fue de 41, 28 y 69 %, respectivamente. La retención de N en los pollos usando el método de sacrificio fue inferior a la retención de nitrógeno reportada (de 61- 80 %) en pollos usados en estudios de balance de nitrógeno sometidos a alimentación restringida (Gómez et al., 2012; Gomez-Rosales y Angeles, 2015); pero es más acorde a la retención de nitrógeno (de 29-43 %) en pollos alimentados a libertad (Gomez y Angeles, 2011).

Retención y pérdidas de nitrógeno total
Lixiviado de lombricomposta Error estándar de la media
Agua Crudo Pasteurizado
Balance de nitrógeno
Contenido de N de la dieta, % 3.75 3.75 3.75 ND
Consumo diario de N, g 4.94 4.93 4.96 0.055
Consumo total de N, kg 2.07 2 2.08 0.095
Retención de N en los pollos, kg 0.85 0.83 0.91 0.04
Retención en N los pollos/consumo de N, % 40.73 40.96 42.22 1.123
Retención de N en la cama, kg 0.61 0.55 0.56 0.054
Retención de N en cama/consumo de N, % 29.23 27.09 27.26 1.646
Retención de N en pollos + cama, kg 1.49 1.42 1.46 0.087
Retención de N en pollos y cama/consumo de N, % 69.96 67.84 68.93 2.52
Pérdidas de nitrógeno por corral y por pollo
N perdido total, kg 0.58 0.61 0.6 0.118
N perdido total, % 28.08 30.56 29.06 1.079
N perdido/pollo vivo/día, g 1.37 1.48 1.41 0.133
N perdido/kg de pollo vivo/día, g 0.62 0.68 0.63 0.058

Balance de nitrógeno y pérdidas de nitrógeno n= 8. ND = no determinado. a No se observaron diferencias estadísticas significativas entre tratamiento (P > 0.5)

En teoría, el resto del N no recuperado en los pollos fue excretado hacia la cama, esto es que, se esperaba recuperar el 59 % del N excretado por los pollos; sin embargo, solamente se recuperó 28 % de N en la cama, por lo que se asume que el N faltante se perdió en forma de amoniaco hacia el ambiente; esto es que 31 % del N consumido y excretado se desprendió de la cama por volatilización en el interior de la caseta durante el periodo de 24 días, tiempo que los pollos permanecieron en el experimento. En las camas, las pérdidas de N en forma de amoniaco se deben a la mineralización microbiana de la urea y el ácido úrico que representan hasta el 80 % del nitrógeno total excretado (Zhang et al., 2015).

Las pérdidas de N por pollo y por kg de pollo indican que se volatizó un promedio de 1.42 y 0.65 g de N al día, respectivamente; considerando que se requiere 0.216 g de H para la formación de 1 g de amoniaco a partir de 1 g de N; estimando que por pollo y por kilo de pollo producido se generaron 1.72 y 0.78 g de amoniaco. La tasa de formación de amoniaco a partir de la cama depende de la temperatura y humedad ambiental principalmente, y la tasa de acumulación dentro de la caseta depende del tamaño de la caseta, número de pollos y grado de ventilación (Feng-Xiang et al., 2012; Wei et al., 2015). Sin embargo, se debe tomar en cuenta que cuando el amoniaco se libera de la cama, primero es inspirado por el pollo antes de distribuirse en el ambiente de la caseta. Si la caseta presenta una ventilación adecuada, los efectos perjudiciales del amoniaco en el pollo pueden ser leves; pero si la ventilación no es adecuada, el pollo permanecerá más tiempo expuesto a la toxicidad del gas, porque lo estará inspirando constantemente. Por lo anterior, es necesario seguir en la búsqueda de alternativas alimenticias y de manejo ambiental para mitigar las emisiones de gases contaminantes como el amoniaco en el interior de las casetas, para reducir sus impactos detrimentales en la productividad y salud de las aves.

 CONCLUSIONES

Los resultados indican que se puede mejorar el rendimiento de la pechuga en pollos de engorda alimentados con dietas adicionadas con antibióticos promotores del crecimiento y adicionados con 20 % de LLP en el agua de bebida. La adición de 20 % de LLC o LLP no mejoró la retención de nutrientes en los pollos o las camas, ni el balance o pérdidas de N en pollos de 21 a 45 días de edad.

 LITERATURA CITADA Arif M, Alagawany M, Abd El-Hack ME, Saeed M, Arain MA, Elnesr SS. 2019. Humic acid as a feed additive in poultry diets: A review. Iranian Journal of Veterinarian Research. 20(3):167-172. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31656520/ Arif M Alagawany M Abd El-Hack ME Saeed M Arain MA Elnesr SS. 2019 Humic acid as a feed additive in poultry diets: A review Iranian Journal of Veterinarian Research 20 3 167 172 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31656520/ Association of Official Analytical Chemists. 2019. Official methods of analysis of AOAC International. 21st Edition. Arlington, VA, USA. ISBN 0-935584-77-3. https://www.aoac.org/official-methods-of-analysis-21st-edition-2019/ Association of Official Analytical Chemists 2019 Official methods of analysis of AOAC International 21 Arlington, VA, USA 0-935584-77-3 https://www.aoac.org/official-methods-of-analysis-21st-edition-2019/ Canellas LP, Olivares FL, Aguiar NO, Jones DL, Nebbioso A, Mazzei P, Piccolo A. 2015. 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Clave: e2020-76.

 Articles Productive responses and nitrogen balance in broilers fed with humic substances in the drinking water ABSTRACT

Humic substances obtained from vermicompost are an option to improve productivity and reduce ammonia emissions in broiler houses. The objective of the study was to evaluate the addition of 20% raw (RWL) or pasteurized (PWL) vermicompost leachate in the drinking water on production and carcass variables, broiler and litter chemical composition and gain, and nitrogen retention and losses in broilers from 21 to 45 days of age. A conventional diet supplemented with antibiotic growth promoters was offered throughout the experiment. Results indicate that breast performance was improved (P < 0.05) in broilers fed 20 % PWL in the drinking water compared to broilers that drank the RWL or water alone. The addition of 20 % RWL or PWL did not improve nutrient retention in chicks or litter or nitrogen balance or losses in 21- to 45-day-old chicks. PWL can be added to broiler drinking water to improve breast performance.

 Keywords: broilers wormcomposting leachate humic substances nitrogen ammonia INTRODUCTION

Humic substances (HS) have been evaluated for some years as growth-promoting and health-enhancing additives in broilers and layers (Sanmiguel et al., 2014; Arif et al., 2019). Research results in broilers supplemented with HS indicate improvements in body weight, feed conversion, carcass weight and intestinal villus morphology (Ozturk et al., 2012; Taklimi et al., 2012; Disethle et al., 2017). Higher digestibility and retention of energy, nitrogen and ash have also been observed in chickens supplemented with HS in the drinking water (Gomez-Rosales and Angeles, 2015).

The main components of HS are humic acids (HA), fulvic acids (FA) and humins; they originate from the decomposition of organic matter, are very common in nature and are naturally present in drinking water, soil and lignite. HSs are molecules with a three- dimensional structure containing an aromatic core with heterocyclic oxygen and nitrogen; in the side chains there are functional groups that confer colloidal, spectral, and electrochemical and ion-exchange qualities (Lehmann and Kleber, 2015; Piccolo et al., 2019). SH can be found in concentrations of between 8-12% in composts and vermicomposts prepared with different sources of organic matter and domestic animal manure (Gómez et al., 2013). HS are also found, although in smaller amounts, in the liquid (leachate) that drains from vermicompost beds after irrigation.

Two of the proposed mechanisms of action suggest that HSs act: 1) by increasing membrane permeability due to their detergent effect, as they behave as natural surfactants and can adsorb on different surfaces including biological membranes increasing nutrient absorption (Gad El-Hak et al., 2012; Disetlhe et al., 2017) and 2) as detoxifying agents in the intestine due to their reducing power in the absorption of nitrates, fluorides and heavy metals (Taklimi et al., 2012; Orsi, 2014). HS can inhibit soil and rumen ammonia production, which has been associated with increased efficiency of microbial protein synthesis (Zhang et al., 2013; Terry et al., 2018). Also, HS reduce ammonia emissions from manure of pigs supplemented with different sources of SH by a probable reduction of bacterial urease activity (Ji et al., 2006) and ammonia concentration in fresh excreta of chickens supplemented with SH (Maguey-Gonzalez et al., 2018).

Broilers are fed high-protein diets, which can cause ammonia excesses inside the intestine (Qaisrani et al., 2015; Lemme et al., 2019), causing mucosal damage such as reduced villus height and crypt depth (Feng-Xiang et al., 2012; Zhang et al., 2015). Increased ammonia emissions from litter excreta are also present inside the houses, due to high N excretion, causing reductions in weight gain and increased feed conversion (Zhang et al., 2015); in addition to damage to mucus flow, ciliary action and mucous membranes of the respiratory tract (Wang et al., 2020; Zhou et al., 2020); reduced specific antibody titers and other immune functions, with increased susceptibility to disease and increased mortality (Wei et al., 2015; Zhou et al., 2020). In a previous study, it was observed that broilers supplemented with a vermicompost leachate (WL) had higher N retention as the WL dose was increased, with respect to the control group (Gomez- Rosales and Angeles, 2015); reductions of up to 30 % in ammonia content were also observed in excreta from chickens supplemented with HS extracted from vermicompost (Maguey-Gonzalez et al., 2018).

Obtaining vermicompost from animal excreta represents a sustainable option for nutrient recycling and mitigation of toxic gas emissions such as ammonia, and they are also a renewable source of HS that when added to broiler feeds have the capacity to improve growth, nitrogen retention and reduce ammonia emissions from excreta (Maguey-Gonzalez et al., 2018; Domínguez-Negrete et al., 2019). In previous work in chickens supplemented with HS extracted from vermicompost the feeds offered to the chickens were devoid of growth-promoting antibiotics (Gomez-Rosales and Angeles, 2015; Maguey-Gonzalez et al., 2018; Domínguez-Negrete et al., 2019), but the positive effects of HS on growth and nitrogen use in chickens supplemented with HS and growth- promoting antibiotics in the same diet are unknown. This information is important since in Mexico the addition of growth-promoting antibiotics in feed is a common practice. With the above background, a study was designed to evaluate the addition of raw or pasteurized vermicompost leachate on production and carcass variables, composition and gain of chemical components of broilers and litter, and nitrogen retention and losses in broilers from 21 to 45 days of age.

 MATERIAL AND METHODS Location, animals and experimental design

The study was conducted at the National Center for Disciplinary Research in Physiology and Animal Improvement of the National Institute of Forestry, Agriculture and Livestock Research (Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias,) INIFAP). The protocol was reviewed and approved by the Animal Use Ethics Committee and complied with the Mexican Official Standard (NOM-062-ZOO, 1999). A total of 421 Ross 308 chicks aged 21 to 45 days, housed on the floor (17-18 chicks/cage), with eight replicates per treatment, were fed a diet formulated with corn and soybean paste to meet the nutrient recommendations of the strain, offered free access. Bacitracin methylene disalicylate (BMD) at 11% was included as a growth-promoting antibiotic at a dose of 500 ppm equivalent to 55 ppm of active ingredient; and salinomycin at 12% at a dose of 500 ppm equivalent to 60 ppm of active ingredient for the prevention of coccidiosis. Treatments were as follows: 1) broilers received drinking water directly from a storage tank connected to bell drinkers, 2) 80 % tank water was mixed with 20 % raw WL (RWL) and 3) 80 % tank water was mixed with 20 % pasteurized WL (PWL). The WL was obtained from vermicompost prepared from sheep manure. In treatment 2, before mixing the WL with the drinking water, it was filtered using cotton cloth (diaper cloth). In treatment 3, the WL was filtered and heated at 65 ºC for 1 h before mixing with water. In treatments 2 and 3, the water-WL mixture was put into 20-L plastic jugs and connected to bell troughs. The contents of HA, FA and total humic acids (THA) were 0.30, 0.33 and 0.66 %, respectively.

 Recording of production variables

The body weight of the chicks was recorded at the beginning and end of the study and the daily weight gain (DWG, g/d) was estimated as the difference between the final weight (42 d) and the initial weight, divided by the experiment day number. Feed offered and rejected was also monitored to estimate the daily feed intake (DFI, g/d). Feed conversion (FC) was calculated by dividing the DFI by DWG. Daily water consumption (DWCg, ml/d) was quantified and water consumption/feed consumption was calculated. Mortality was recorded daily. At the end of the experiment and after a 12 h fast, five broilers were slaughtered from each pen and carcass and breast weights were recorded. Carcass and breast weights were expressed in grams (g) and the yield was calculated as a percentage (%), dividing by body weight.

 Sampling and laboratory analysis

At the beginning of the experiment, before putting the chickens in pens, the floor was cleaned by placing 11 kg of new sawdust and a sample was taken; at the end, the complete litter was weighed and a sample was taken from each pen. At the beginning of the experiment, three groups of chickens from the same flock of chickens used in the experiment were slaughtered; at the end, three chickens were slaughtered per pen with an average weight similar to the average weight per pen. Feed samples were also taken every week.

Litter samples were freeze-dried and ground using a 2 mm sieve. Slaughtered chickens were plucked and feather and body weights were recorded and analyzed separately. The whole body was ground in a meat grinder and a representative sample was taken. The body and feathers were freeze-dried separately and ground. Feed samples were ground using a 2 mm sieve. In litter, broiler carcass, feather and feed samples, dry matter (DM), ash (A) and nitrogen (N) were determined. All laboratory determinations were carried out following recommendations AOAC (2019).

 Calculations of the chemical composition of chickens and litter

The following formulas were used to estimate total DM, A and N of litter and broilers at the beginning and end of the experiment in each pen:

DM, A and N in litters ,kg =% DM, A and N x weigth of litters ;;

DM, A and N in chickens, kg*=(% de DM, A and N of chickens x weight of chikens)+(%de DM, A and N of feathers x weight of feathers,kg);

*The sum of the N of the body and feathers was made in amounts equivalent to the weight of the body and feathers at the beginning and at the end of the experiment.

Total feed consuption,kg=DFI x number of chikens per pen x24 days;

Total consuption of DM, kg=% DM of feed x total feed consumption;

N total intake,kg =DM total intake x % N in feed;

 Calculations of gain of chemical components of chickens and litter

The following formulas were used to calculate the gain of chemical components in broilers per pen:

DM gain in chikens, kg = DM total of chikens at the end - DM total of chikens at the beginning of the experiment;

C again in chikens, kg = Total N of chicks at the end- Total N of chiks at the beginning of the experiment-;

N gain in chikens, kg=Total N of chicks at the end-Total N of chicks at the beginning of the experiment-;

The following formulas were used to calculate the gain of chemical components in the litter per pen:

DM gain in the litter ,kg =total DM in the litter at the end - total DM in the litter at the beginning of the experiment;

C gain in litter,kg= Total C in litter at the end - Total C in litter at the beginning of the experiment;

N gain in litter , kg =Total N in litter at the end - Total N in litter at the beginning of the experiment;

 Calculations of nitrogen retention and losses

The following formulas were used to obtain the N retention in kg and percentage in broilers and litter per pen:

N retention in chikens ,kg = total N in chicks at 45 days - total N in chiks at 21 days;;

N retention in chickens, %=Total N in chickens at 45 days-TotalN in chickens at 21 daysTotal N consumption

N retention, kg = total N in litter at 45 days - total in litter at 21 dyas;

N retention in chickens, %=Total N in beds at 45 days-TotalN in beds at 21 daysTotal N consumptionx100

N retentioen in broilers and litter, kg =total N in broilers an litter at 45 days - total N broilers and litter at 21 days;

N retention in chickens and litter, %=Total N in chickens and litter at 45 days-Total N in chickens and litter at 21 daysTotal N consuption x 100

The amount of N lost in total, per chicken and per kg of chicken produced was calculated as follows:

Total N lost,kg =Total N consumption, kg - N retenction in broilers and litter , kg;

N lost per chiken produced,gd=(Total N lost,kgNumber of chikens)÷24 N lost per chiken produced,gd=Total N lost,kgTotal produced kilograms÷24: Statistical analysis

The results were subjected to analysis of variance under a completely randomized design, using the General Linear Models procedures of the SAS statistical package. Prior to the analysis of variance, assumption verification was carried out. The GDP and CDA variables were transformed using the multiplicative inverse and all variables expressed as percentages were transformed to arcsine to comply with the assumption of normality. Statistical differences between means were analyzed using the least significant difference methodology at P < 0.05.

 RESULTS AND DISCUSSION Production and carcass variables

Table 1 shows the productive variables, carcass and breast weight and yield. Initial weight, final weight, feed consumption, weight gain, feed conversion, water consumption, and water consumption/feed consumption and mortality were similar among the three treatments evaluated. These findings do not agree with those of a study in chickens added with RWL in the drinking water (Gomez-Rosales and Angeles, 2015), obtaining benefits in final weight, weight gain and feed conversion; but using diets devoid of antibiotic growth promoter and anticoccidial products. One of present work purposes was to clarify whether the beneficial effects of WL on broiler growth could be maintained despite the presence of BMD and salinomycin; however, productivity results show that the benefits of WL previously observed using antibiotic-free diets were lost. WL pasteurization was carried out with the intention of eliminating the naturally present microorganisms and nullifying any possible growth-promoting effect that the beneficial flora might exert; as has been suggested in tests of plant growth added with WL, as a source of HS (Canellas et al., 2015; Olivares et al., 2015). Another important difference was that in the previous work a WL from a vermicompost, made with pig and sheep manure containing 0.47, 0.14 and 0.61 % of HA, FA and AHT, respectively, was used (Gomez-Rosales and Angeles, 2015); and in the present work a WL obtained from a vermicompost, made with sheep manure containing 0.30, 0.33 and 0.66 % of HA, FA and THA, respectively, was used.

Productive variables, carcass and breast weight and yield
Worm composting leachate Standard error of the mean
Water Raw Pasteurized
Body weight
Day 21, kg 0.66 0.64 0.66 0.011
Day 45, kg 2.23 2.23 2.26 0.031
DFI, g/day 142.48 141.92 142.87 1.922
DWG, g/day 84.48 87.21 88.09 3.482
DFI/DWG 1.69 1.65 1.64 0.056
DWCg, ml/day 310.82 300.44 299.79 8.747
DWCg/DFI 2.19 2.11 2.08 0.065
Mortality, % 2.50 3.57 2.86 1.336
Breast, g 488.61 488.12 497.49 11.360
Breast, % 23.55a 23.43a 24.67b 0.397
Carcass, g 1193.31 1204.44 1205.26 23.301
Carcass, % 57.58 57.89 59.82 0.751

Productive variables n= 8. Breast and carcass n= 40.a-b Different letters in the same row show statistically different values (P < 0.05).

Breast yield was higher (P < 0.05) in broilers that drank RWL with respect to those that drank only water and RWL (Table 1). Carcass and breast weight and yield were similar between treatments. In a previous study, higher carcass yield was obtained from chickens supplemented with HS extracted from worm composting (Domínguez-Negrete et al., 2019). Higher carcass weight and carcass yield have also been reported in chickens supplemented with increasing amounts of HS in feed and drinking water compared to the control group not supplemented with HS (Ozturk et al., 2010; Ozturk et al., 2012). In a previous report it was found that HS subjected to heating for more than 40 min retain their detergent properties, but present a lower electron transfer capacity of labile chemical groups that are lost during heating (Visser, 1985); probably by reducing the reactions associated with electron exchange between HS and different acceptors, and highlighting only the surfactant effect, increasing the permeability of the membranes; causing the higher breast yield with PWL, compared to RWL.

 Composition and gain of chemical components of broiler chickens

The chemical composition of the slaughtered chickens at the beginning and end of the experiment and the gain of chemical components are presented in Table 2. The initial chemical composition was not analyzed statistically because only a representative sample of the chickens was taken. There were no statistical differences in the chemical composition or chemical component gain of the chickens at the end. The results are not consistent with improvements in protein use efficiency and N and A retention in chickens supplemented with HS (Gomez-Rosales and Angeles, 2015; Disetlhe et al., 2017), through the excreta collection method.

Chemical composition of chickens at the beginning and end of the experiment and gain of chemical components
Worm composting leachate Standard error of the mean
Water Raw Pasteurized
Chemical composition at 21 days
Dry matter, % 26.79 26.79 26.79 ND
Ash, % 7.78 7.78 7.78 ND
Nitrogen, % 12.06 12.06 12.06 ND
Chemical composition at 45 days
Dry matter, % 33.15 33.72 34.46 0.809
Ash, % 8.23 7.77 7.8 0.307
Nitrogen, % 12.11 11.95 12.13 0.065
Gain of chemical components per pen at
Dry matter, kg 9.74 9.78 10.55 0.352
Ash, kg 2.31 2.09 2.19 0.127
Nitrogen, kg 1.18 1.16 1.22 0.048

Chemical composition n= 24. Gain of chemical components n= 8, ND = not determined. a No significant statistical differences were observed between treatments (P > 0.5).

It has been reported that HS are able to regulate N availability for plants in the soil, due to their adsorptive properties, binding directly with ammonia or stimulating the activity of disintegrating bacteria that facilitate N uptake through the roots (Canellas et al., 2015; Olivares et al., 2015). It was expected that this same effect could be carried out in the chicken intestine, reducing ammonia levels released in the digestive tract, improving health, production and nutrient retention (Qaisrani et al., 2015; Lemme et al., 2019). Probably the presence of BMD and salinomycin counteracted the effects of HS observed in previous work.

Table 3 shows the chemical composition of the litter at the beginning and end of the experiment and the gain of chemical components. The chemical components at the beginning were not statistically analyzed because only a representative sample of the litter was taken. There were no statistical differences in the chemical composition or chemical component gain of the litter at the end. Previous studies have reported that HS can inhibit urease activity present in soil bacteria (Zhang et al., 2013) and ammonia emissions from excreta of pigs and chickens supplemented with HS (Ji et al., 2006; Maguey-Gonzalez et al., 2018).

Chemical composition of the litters at the beginning and end of the experiment and gain of chemical components
Worm composting leachate Standard error of the mean
Water Raw Pasteurized
Chemical composition at 21 days
Dry matter, % 97.66 97.66 97.66 ND
Ash, % 4.77 4.77 4.77 ND
Nitrogen, % 1.53 1.53 1.53 ND
Chemical composition at 45 days
Dry matter, % 70.87 71.61 69.29 2.936
Ash, % 17.89 18.19 18.15 0.53
Nitrogen, % 3.6 3.51 3.54 0.074
Gain of chemical components per pen at
Dry matter, kg 10.46 9.4 9.6 1.199
Ash, kg 3.26 3.16 3.17 0.213
Nitrogen, kg 0.61 0.55 0.56 0.054

Chemical composition and gain of chemical components n= 8. ND = not determined. a No significant statistical differences were observed between treatments (P > 0.5).

In the present study, it was expected that HS would bind to ammonia inside the intestine and in the litter, reducing N losses by volatilization, and consequently, higher N retention in the litter at the end. Probably the presence of the antibiotics counteracted the effects of HS in the litter.

 Retention and losses of nitrogen from broilers and litter

Table 4 shows the results of nitrogen balance and loss during the experiment. None of the variables analyzed showed differences between treatments. These findings do not coincide with the higher breast yield, which could suggest that there was greater efficiency in the use of N for muscle protein synthesis, nor with the higher N retention reported in a previous work in chickens supplemented with RWL (Gomez-Rosales and Angeles, 2015). The results are not consistent with improvements in protein use efficiency and N and A retention in chickens supplemented with HS (Gomez-Rosales and Angeles, 2015; Disetlhe et al., 2017).

The lack of differences in N balance coincides with the lack of differences in broiler productivity. N retention efficiency in broilers, litter and broilers + litter was 41, 28 and 69%, respectively. N retention in broilers using the culling method was lower than reported nitrogen retention (of 61-80 %) in broilers used in nitrogen balance studies subjected to restricted feeding (Gómez et al., 2012; Gomez-Rosales and Angeles, 2015); but is more in line with nitrogen retention (of 29-43 %) in free-fed broilers (Gomez and Angeles, 2011).

Retention and losses of total nitrogen
Worm composting Worm composting Standard error of the mean
Water Raw Pasteurized
Nitrogen balance
N content of the diet, % 3.75 3.75 3.75 ND
Daily N intake, g 4.94 4.93 4.96 0.055
Total N intake, kg 2.07 2 2.08 0.095
N retention in broilers, kg 0.85 0.83 0.91 0.04
N retention in chickens/N consumption, % 40.73 40.96 42.22 1.123
N retention in litter, kg 0.61 0.55 0.56 0.054
N retention in litter/N consumption 29.23 27.09 27.26 1.646
N retention in broilers + litter, kg 1.49 1.42 1.46 0.087
N retention in broilers and litter/N consumption, % 69.96 67.84 68.93 2.52
Nitrogen losses per pen and per chicken
Total N lost, kg 0.58 0.61 0.6 0.118
Total N lost, kg, % 28.08 30.56 29.06 1.079
N lost/chicken live/day, g 1.37 1.48 1.41 0.133
% N lost/chicken live/day, kg 0.62 0.68 0.63 0.058

Nitrogen balance and nitrogen losses n= 8. ND = not determined. a No significant statistical differences were observed between treatments (P > 0.5).

Theoretically, the rest of the N not recovered in the broilers was excreted to the litter, i.e., 59% of the N excreted by the broilers was expected to be recovered; however, only 28% of N was recovered in the litter, so it is assumed that the missing N was lost as ammonia to the environment, i.e., 31% of the N consumed and excreted was released from the litter by volatilization inside the house during the 24-day period that the broilers remained in the experiment. In litter, N losses in the form of ammonia are due to microbial mineralization of urea and uric acid accounting for up to 80 % of the total nitrogen excreted (Zhang et al., 2015).

N losses per chicken and per kg of chicken indicate that an average of 1.42 and 0.65 g of N per day were volatilized, respectively; considering that 0.216 g of H is required for the formation of 1 g of ammonia from 1 g of N; estimating that per chicken and per kg of chicken produced, 1.72 and 0.78 g of ammonia were generated. The rate of ammonia formation from litter depends mainly on ambient temperature and humidity, and the rate of accumulation inside the house depends on house size, number of chickens and degree of ventilation (Feng-Xiang et al., 2012; Wei et al., 2015). However, it should be taken into account that when ammonia is released from the litter, it is first inspired by the chick before it is distributed in the house environment. If the house is adequately ventilated, the harmful effects of ammonia on the chicken may be slight; but if the ventilation is not adequate, the chicken will remain exposed to the toxicity of the gas for a longer period of time, because it will be constantly breathing it in. Therefore, it is necessary to continue searching for feed and environmental management alternatives to mitigate the emissions of polluting gases such as ammonia inside the houses, in order to reduce their detrimental impacts on the productivity and health of the birds.

 CONCLUSIONS

The results indicate that breast performance can be improved in broilers fed diets supplemented with antibiotic growth promoters and 20% PWL in the drinking water. The addition of 20 % RWL or PWL did not improve nutrient retention in broilers or litter, nor N balance or losses in broilers 21 to 45 days of age.

Code: e2020-76.